AAV定制包装 慢病毒定制包装 载体克隆
派真全血清型AAV包装服务系统
派真AAV包装服务提供所有AAV血清型选择:除了常规的1~9,rh10,DJ外,还有最新的PHP.eB, PHP.S, Anc80等,以及客户要求的任意定制AAV血清型(定制的血清型不能保证产量)。
派真AAV包装服务覆盖科研人员的多种需求:初纯及高纯度;高纯度AAV的多种产量。
AAV服务介绍
Introduction
用中等生产规模生产、收获AAV后进行超速离心得到经初纯步骤的浓缩AAV(溶于DMEM培养基),以SYBR Green QPCR对AAV滴度进行精确定量。 可用于对AAV纯度要求不高的培养细胞水平实验。推荐使用对大部分细胞都具有高感染能力的AAV-DJ,或偏好感染骨髓来源细胞的AAV6血清型。
高纯、高滴度AAV会带来理想的动物实验效果以及适合所有的培养细胞水平实验。派真生物进行大量超纯提取质粒、三质粒共转染HEK293细胞、浓缩AAV、超高速梯度离心纯化AAV,并以SYBR Green QPCR的方法对AAV滴度进行精确定量,以及以SDS-PAGE电泳考马斯高蓝染色方式对AAV纯度进行测定,以得到高纯高滴度AAV。
AAV服务流程
Process
服务描述 滴度&体积 客户会收到
AAV初纯浓缩 2 ml

1. 初纯浓缩AAV

2. 质粒质检报告

3. AAV滴度检测报告

4. 使用说明书

完成期限 6-9工作日
服务描述 滴度&体积 客户会收到
AAV高纯2E12GC ≥1E+13 GC/ml 0.2 ml

1. 高纯浓缩AAV

2. 质粒质检报告

3. AAV滴度检测报告

4. 使用说明书

AAV高纯5E12GC ≥1E+13 GC/ml 0.5 ml
AAV高纯1E13GC ≥1E+13 GC/ml 1 ml
AAV高纯2E13GC ≥1E+13 GC/ml 2 ml
AAV高纯5E13GC ≥1E+13 GC/ml 5 ml
AAV高纯1E14GC ≥1E+13 GC/ml 10 ml
AAV高纯2E14GC ≥1E+13 GC/ml 20 ml
完成期限 6-9工作日
AAV质控方式
Quality control method
(1)多重酶切鉴定生产病毒所用质粒(常规质控);
(2)SYBR Green QPCR标准曲线精确定量(常规质控),报告结果通常如下图。
(3)SDS-PAGE电泳与考马斯亮蓝染色确定纯度(用于高纯度AAV的常规质控)。


图注:派真AAV生产的常规检测结果

(4)HPLC纯度检测(用于高纯度AAV的可选质控,需额外2个工作日和费用¥200/样品)。
(5)电镜检测(用于高纯度AAV的可选质控,需额外3个工作日和费用¥400/样品)
(6)内毒素检测(用于高纯度AAV的可选质控,需额外3个工作日和费用¥1500+50×样品数)


图注:派真AAV2-EGFP样品的HPLC测试,第一个峰为AAV。
按峰面积比例计算纯度为99%。

图注:派真AAV2-EGFP样品的电镜照片,
多视野统计结果出空壳率2%。

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