AAV小知识 派真AAV生产 行业资讯 CRISPR+AAV AAV血清型 AAV常见问题

问 rAAV的生物安全性如何?操作上需要注意什么?

答 超过90%的人口体内存在AAV,但自发现AAV至今50年内未发现任何疾病与AAV相关。自然界的AAV为复制依赖型病毒,没有其它病毒的辅助时其自身复制效率极低。Recombinant Adeno-Associated Virus (rAAV)为重组型AAV,全部蛋白编码(Rep/Cap)均已被剔除,只余下含有指引包装信息的DNA反式序列ITR在其两端,外源序列插入在两个ITR之间,因此理论上不存在自我复制的可能。rAAV作为基因治疗载体的安全性在20多年前已被FDA认可,其生物安全性为一级,与质粒DNA相同;如果携带的外源序列中有致癌或有毒基因,请按安全性为二级操作,与慢病毒相同。

问 rAAV包装外源序列的上限是多少?能表达多长的基因?

答 rAAV的基因组包装上限约为5Kb,除去两端ITR序列各145bp,则能容纳4.7Kb的外源序列;派真的K101载体提供了目前最小的广谱启动子EFS(EF1a short, 250 bp)及终止子(50 bp)表达盒,可表达约4.4Kb长度的基因,已是能包装基因长度的极限。